Застосування генної гармати у розвитку фруктів

Вишня - це плід, який відносно залежить від клімату. Під час розвитку плодів його дозрівання регулюється абсцизовою кислотою (АВА).

У цьому дослідженні для індукованого вірусом глушіння генів (VIGS) та методу бомбардування частинками були використані для виявлення чотирьох кДНК, що кодують 8'-гідроксилазу (ключовий фермент для окислювального катаболізму ABA) у плодах черешні. Дезоксирибонуклеїнова кислота) Paccyp707a1-a4

Paccyp707a2 негативно регулює дозрівання вишні, а paccyp707a1 опосередковує посухостійкість.

Індуковане вірусом замовчування генів (VIGS) відноситься до вірусу, що заражає рослину, що містить фрагмент цільового гена, який може індукувати ендогенне замовчування гена, викликати фенотипічні зміни, а потім вивчити функцію цільового гена на основі фенотипічної зміни.

Малюнок 1. Зміни в біосинтезі АБА (уповільнений1), катаболізмі АБА (paccyp707as) та генах, пов'язаних із вмістом АБА, під час розвитку та дозрівання плодів черешні. (a) Абсолютний рівень стенограми чотирьох pacyp707as під час розвитку плодів. (b) Відносний рівень стенограми, накопичений pcnced1 та aba під час розробки. Актин використовувався як внутрішній контроль, і його експресія була виявлена qrt-pcr.

Експресія гена pAccyp707a в реакції дегідратації

Плоди, зібрані за 32 дні, поділилися на дві групи, а рівень втрати води становив 16% при відносній вологості 45% після зберігання протягом 3 днів в умовах низької відносної вологості (45%) та високої відносної вологості (100%). Вміст ABA та рівень транскрипції pNCED1 у фруктах були значно вищими, ніж у контрольній групі. Він контролює (мал. 2). На відміну від цього, експресія Paccyp707a1 була значно знижена після дегідратації, а експресія Paccyp707a3 була також знижена, хоча і меншою мірою, і на експресію Paccyp707a4 та Paccyp707a2 не впливало зневоднення (рис. 2). Найбільш суттєві зміни відбулися в експресії paccyp707a1, який може бути головним чутливим до посухи членом сімейства генів paccyp707a під час дозрівання плодів.

Замовчування гена Paccyp707A2 сприяє забарвленню та дозріванню плодів

Фенотип плодів обробляли Paccyp707A1 / 2-RNAi. На 28-й день після цвітіння було відібрано 90 плодів із трьох вишневих дерев, посаджених в окремі сади, та поділено на три групи по 30 для експериментів, що викликали віруси з придушенням генів.

Paccyp707a1-rnai, paccyp707a2-rnai та контрольний trv вектор (без гена cyp707a) вводили у плодоніжки плодів груп 1, 2 та 3 відповідно.

Плід оцінювали через 7 днів після щеплення.

(a) обробка плодів (d) 28 днів після цвітіння;

(b) 43d для обробки фруктів;

(c) обробка фруктів 43d trv (без гена cyp707a);

(d) 43 d плодів, оброблених pacyp707a1 RNAi;

(e) обробка плодів paccyp707a2 RNAi;

(f) фрукти, оброблені Paccyp707a2 RNAi через 6 днів після лікування (правильний контроль);

(g) paccyp707a1 RNAi через 6 днів після обробки фруктів (контрольний плід справа).